测定意义：HYP是机体胶原蛋白主要成分之一，胶原蛋白大多分布于皮肤、腱、软骨和血管等，因此HYP含量是反映胶原组织代谢及纤维化程度的一项重要指标。

　　HYP是机体胶原蛋白主要成分之一，胶原蛋白大多分布于皮肤、腱、软骨和血管等，因此HYP含量是反映胶原组织代谢及纤维化程度的一项重要指标。

　　样品经水解产生游离的HYP，进一补被氯胺T氧化，氧化产物与对二甲氨基ben甲醛反应，产生红色化合物，在560nm处有特征吸收峰。通过测定样品水解液560nm吸光值，可计算HYP含量。

　　HYP是机体胶原蛋白主要成分之一，胶原蛋白大多分布于皮肤、腱、软骨和血管等，因此HYP含量是反映胶原组织代谢及纤维化程度的一项重要指标。

　　样品经酸水解产生游离的HYP，进一步被氯胺T氧化，氧化产物与对二甲氨基ben甲醛反应，产生红色化合物，在560nm处有特征吸收峰。通过测定样品水解液560nm吸光值，可计算HYP含量。

　　天平、烘箱、玻璃管、离心机、水浴锅、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、6mol/L盐酸和蒸馏水。

　　1.组织：称取约0.5g样品于玻璃管，将组织尽量剪碎以便消化，盖子稍松不密闭。加入5mL的提取液，煮沸或110℃烘箱26小时消化没有可见大的团块，16000rpm，25℃，离心20min（若离心后仍有杂质，可通过过滤去除），用10mol/LNaOH（约3mL）调节pH值6～8范围内。蒸馏水定容8mL，取上清待测。（过程中可能有黑色物质生成，若长时间不能消化，可能为碳化的物质）

　　2.细胞：取500万个细胞，加入1mL的提取液，煮沸或110℃烘箱26小时消化透明状，16000rpm，25℃，离心20min，用10mol/LNaOH（约0.5mL）调节pH值6～8范围内。蒸馏水定容2mL，取上清待测。

　　以标准溶液的浓度为x轴，?A标准（?A =A标准管-A对照管）为y轴，绘制标准曲线，得到方程y=kx+b。将?A测定（?A =A测定管-A对照管）带入方程得到x。

　　组织羟脯氨酸含量（g/g鲜重）= x×V样品÷（W×V样品÷V组提）=8x÷W。

　　细胞羟脯氨酸含量（g/104cell）= x×V样品÷（细胞数量×V样品÷V胞提）=2x÷细胞数量。

　　V样品：加入的样品体积，0.2mL；V组提：组织提取液体积，8mL；V胞提：细胞提取液体积，2mL；W：样本鲜重；细胞数量：以104计；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL。